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分享PCR實驗室設計及建設基本要求
發表時間： 2020-07-10
PCR實驗指的是基因擴增實驗，其特點是能將微量的DNA大幅增加，是分子生物學研究和實驗的常規方法，PCR實驗室廣泛應用于生物學各個領域，例如：乙型肝炎，禽疫病、艾滋病檢測，癌基因的檢測和診斷，個體識別，DNA指紋，親子鑒定及法醫物證等等。湖南實驗室建設就PCR實驗室設計和建設要求逐一給大家解釋：
一、PCR實驗室布局
1、PCR實驗室原則上分為：①試劑準備區；②樣品制備區；③擴增區；④擴增產物分析區，共四個單獨的工作區域。并設有專用走廊，各工作區域應設緩沖間，工作區與緩沖間宜安裝連鎖裝置。
2、不同功能的工作區應是分隔獨立的，各工作區有明顯的標志，不能直通，如果緊密連接，需安裝物品傳遞窗。
① 試劑準備區和樣品制備區為擴增前區；
② 擴增區和擴增產物分析區為為擴增后區，即從：試劑準備區——樣品制備區——PCR擴增室——產物分析室，不得逆向流動。
3、實驗室的氣流也應從擴增前區流向擴增后區，不得逆向流動。
4、各工作區的頂部應該安裝紫外燈，紫外燈波長一般為254mm,配置要求為每20㎡一支40W的紫外燈。
二、實驗室各區功能及主要設備
1、試劑準備區：
① 主要進行試劑的制備，分裝和主反應混合液的制備。試劑盒用于樣品制作的材料應直接運送至該區域。
② 試劑原材料必須貯存在本區內，并在本區內制備成所需的試劑。
③ 本區主要設備有冰箱，天平，離心機，加樣器，振蕩器等。
④ 本區對氣流壓力的控制，并沒有嚴格的要求，一般為+10Pa。
2、樣品制備區：
① 主要進行樣品的保存，核酸提取，貯存及其加入至擴增反應管和測定DNA的合成。
② 本區主要設備有冰箱，生物安全柜，離心機，加樣器，振蕩器等。
③ 本區的壓力梯度要求為：相對于鄰近區域為正壓，以避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染，壓力一般設計為+10Pa。
3、擴增區：
① 主要進行DNA擴增項目。
② 已制備的DNA模板(來自樣品制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑準備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。
③ 本區主要設備有：冰箱，加樣器，離心機，擴增儀等。
④ 本區的壓力梯度要求為：相對于鄰近區域為負壓，以避免氣溶從本區漏出，壓力一般設計為-25Pa。
4、 擴增產物分析區：
① 主要進行擴增產物的測定。
② 本區主要設備有加樣器，洗板機、酶標儀和水浴箱等。
③ 本區的壓力梯度的要求為：相對于鄰近區域為負壓，以避免擴增產物從本區擴散至其它區域，壓力一般設計為-25Pa。
三、PCR實驗室通風系統及壓力控制
① 各區域之間應具備單間的實驗工藝流、氣流、物流與人流，形成單向流程的保護屏障。避免實驗室之間的相互干擾，也防止氣溶膠擴散對實驗過程造成污染。
② PCR實驗室并沒有嚴格的凈化要求，但是為避免各個實驗區域交叉污染的可能性，宜采用全送全排的氣流組織形式，嚴格控制送風、排風的比例，以保證整個實驗區的壓力要求。
四、PCR實驗室裝飾
① 實驗室圍護結構應牢固，氣密性好;
② 所有陰陽角宜采用圓弧過度;
③ 墻體內壁光潔，不積塵、易清洗、易消毒、耐腐蝕;
④ 地面使用環氧樹脂自流坪或PVC卷材，材料應滿足光潔、耐腐蝕、無縫隙、無滲漏的基本要求。
五、PCR實驗室注意事項
1、區域大小設置：樣品制備區要放置生物安全柜和低溫冰箱，空間應大一些。而試劑準備區，擴增區，擴增產物分析區，空間可以相對小一些。
2、應急裝置配備：試劑準備區，樣品制備區應設緊急洗眼器，以保證操作人員的安全。
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